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未成熟卵母细胞的收集

作者:千日成 来源:人民卫生出版社 2015-08-24 16:39:23

核心提示: 1.3 未成熟卵母细胞的收集在B超下经阴道穿刺取卵技术已经成为目前普遍使用的取卵技术。取未成熟卵子的具体操作事宜和IVF周期的卵子获取相似。取卵一般使用小口径针头

      1.3 未成熟卵母细胞的收集BVx试管婴儿网

在B超下经阴道穿刺取卵技术已经成为目前普遍使用的取卵技术。取未成熟卵子的具体操作事宜和IVF周期的卵子获取相似。取卵一般使用小口径针头(19G或20G),这样可以减少患者的痛苦和对于小卵泡的损伤,因此可以允许收集更多的未成熟卵子。BVx试管婴儿网

因为小卵泡内的压力已经很高,吸引器的吸力应降低到85mmHg,即正常IVF周期取卵吸力的一半。过高的吸力会造成裸卵比例增加 。高质量的超声波扫描成像是成功取卵的一个关键。卵泡的大小不一,而且一些特定的卵泡也许很难被吸取;即使它们被吸取,也可能不会从中获取到卵子,特别是那些很小的卵泡(直径<4mm)。吸取液被收集在一个盛有2ml含肝素的培养液的10ml试管里面(一般含有2单位/毫升的肝素)。BVx试管婴儿网

与收集IVF的周期的卵子相似,操作人员首先在解剖显微镜下找出颗粒细胞-卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes,COC)。用常规的方法来识别被很紧凑的颗粒细胞包围的小卵泡是件困难的事情,因为它们很容易被疏忽。一个方法是利用细胞过滤网(cell strainer)来辅助捡卵,将卵泡液在细胞过滤网上面过滤(70µm)。过滤后收集到的组织再次被提前预热的冲洗液进行冲洗,随后被转移到一个培养皿里面来再次寻找剩余的未成熟卵子。一切操作需要在37℃的热台上完成。初步鉴定卵子是否成熟,一个特殊的找卵方法叫做“滑动法(sliding method)”。即在解剖显微镜下,COC随着皿的来回倾斜,被培养液带动着在皿底来回滑动。在滑动的过程中,操作者可以清楚地识别出,卵母细胞的胞质中含有GV,或在卵间隙中出现了第一极体。如果以上两种情况都没有出现,则说明卵母细胞正处于GVBD期(ΜⅠ期)。BVx试管婴儿网

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