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显微受精

作者:韩伟 来源:人民卫生出版社 2015-08-29 12:14:29

核心提示: 1.2 显微受精1.2.1显微受精的发展史 据统计,不育夫妇约占生育年龄夫妇的10% ,世界上第一例试管婴儿于1978年诞生,为女性输卵管堵塞性不育提供了令人振奋的全新方法。但不

      1.2 显微受精7QO试管婴儿网

1.2.1显微受精的发展史  7QO试管婴儿网

据统计,不育夫妇约占生育年龄夫妇的10% ,世界上第一例试管婴儿于1978年诞生,为女性输卵管堵塞性不育提供了令人振奋的全新方法。但不育夫妇中约30% 是由男性因素引起的,另有20%30% 是夫妇双方因素共同导致,因此男性因素是引起不育的主要原因之一。随着试管婴儿技术应用的不断扩大,男性精子问题造成受精障碍的情况日益增多,对此传统试管婴儿技术治疗效果甚微,甚或无能为力。  7QO试管婴儿网

男性少弱精在体外受精中最大的困难是精子不能穿过卵母细胞透明带达到精卵融合,因而受精率低下。为此,显微辅助授精技术开始引入试管婴儿中,即通过透明带手术或直接将精子引入卵母细胞内来提高受精率(表5--15)。  7QO试管婴儿网

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1.2.2 透明带打孔/切割/透明带下受精  7QO试管婴儿网

从实际应用结果来看,PZDSUZI方法受精率仅为20% 25% ,要求精子数目/ml,而且多精受精率相对较高;至于PZD,由于在早期即造成透明带缺损,失去对卵母细胞的保护,胚胎产生碎片的机会增加,只有1/3患者有胚胎可供移植,自然妊娠率与活产率下降,这两种方法渐渐不为人们采用。  7QO试管婴儿网

1.2.3 卵胞质内单精子注射受精  7QO试管婴儿网

由于一个偶然的机会,1992年布鲁塞尔自由大学中心(Brussels Free University Centre)的Palermo等进行了ICSI辅助授精获得妊娠成功。其正常受精率明显较PZDSUZI,可达65% 以上,着床率超过20% ,有更多的胚胎可供移植,能有较高的妊娠率。目前,全世界经过大量的临床实践,总结出其特点为:受精率高;无多精受精;精子浓度形态对受精无影响。ICSI最早的适应证是男性因素不育,传统IVF无法受精,随后应用于传统IVF受精失败者。目前不论来自新鲜收集的精液或冻存解冻精子或来自附睾与睾丸取出精子或冷冻解冻的附睾、睾丸精子应用于ICSI均获得受精妊娠。近年来又使用圆形精细胞(spermatidICSI,结合卵母细胞的体外激活方法增加精细胞ICSI的受精率治疗非阻塞性无精症获得成功,使许多无精症的患者有了生育的可能。  7QO试管婴儿网

(一)ICSI实验室的建立  7QO试管婴儿网

ICSI治疗必须建立在成功的IVF治疗的基础之上,成功的IVF实验室是进行ICSI的先决条件,因为进行IVF的所有仪器、设备、实验室条件和进行精卵熟练操作的技术人员都是ICSI成功所必需的。  7QO试管婴儿网

首先对于显微操作者,要求他们要有耐心并且细心,动作细致,观察认真,并能持之以恒,在付出大量时间与精力后,才能建立成功的显微操作系统。  7QO试管婴儿网

1)仪器设备  7QO试管婴儿网

1)倒置显微镜:倒置镜配备有×10×20×40的物镜头,安装显微针后在10倍镜下调节其至适当的位置,进行显微操作则在放大200倍或400倍下进行。倒置镜一定要连接有闭路电视系统,可以监视、录像和教学。安置显微镜的工作台一定要平稳,不受外周环境振动的影响,目前有防震台可以满足要求。显微镜平台上一定要有温度装置,维持卵子所处的环境温度在37  7QO试管婴儿网

2)显微操作臂及其控制系统:显微操作仪由2 个或3个显微操作臂及其控制系统和负压控制系统组成。每个显微操作臂都有-套控制系统调节其在三维空间活动,又分为粗调与微调。在显微操作臂上分别安置固定针及注射计,每个针均有一套液压或气压传动的连接注射器的负压控制系统调节显微针内液体量的进出。在安装时,操作臂的控制系统和这个臂上的针的负压控制系统应安装在显微镜的不同侧面,以便于可以用双手同时对一个针的位置 和负压进行操作。  7QO试管婴儿网

3)其他所需仪器:制备显微针所需的拉针器(puller)、磨针器(grinder)、和锻针器(Micro-forge,及纯水生产系统(MilliQ)。还要常规IVF所必需的仪器如培养箱、离心机等。 

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